Theo Cơ quan Bảo vệ Môi trường Hoa Kỳ, LC50 được định nghĩa là nồng độ của một hóa chất trong không khí hoặc nước, dự kiến sẽ gây ra cái chết ở 50 phần trăm động vật thử nghiệm sống trong không khí hoặc nước đó. Với các xét nghiệm thường được thực hiện trên chuột hoặc chuột, ở mức LC50, 50 phần trăm động vật thử nghiệm sẽ chết sau một lần tiếp xúc. Các thử nghiệm được thực hiện để xác định giá trị LC50 chỉ định động vật nào được sử dụng trong thử nghiệm. Mặc dù các thử nghiệm độc tính trên chuột và chuột không phải lúc nào cũng mở rộng cho con người, giá trị LC50 rất quan trọng và được sử dụng để đảm bảo an toàn khi con người làm việc xung quanh vật liệu.
Viết ra các tiêu chuẩn kiểm tra của bạn để bao gồm động vật nào sẽ được thử nghiệm, có bao nhiêu động vật trong mỗi nhóm thử nghiệm, nồng độ hóa chất sẽ được kiểm tra và thời gian tiếp xúc.
Đối tượng một nhóm động vật thử nghiệm với một nồng độ hóa chất trong môi trường phòng thí nghiệm được kiểm soát. Tiếp tục cho đến khi tất cả các nhóm, ngoại trừ nhóm đối chứng, phải chịu một trong mỗi nồng độ khác nhau của hóa chất.
Xác định giá trị LC50 là nồng độ hóa chất thấp nhất, tính bằng phần triệu (ppm), trong đó ít nhất 50 phần trăm động vật thử nghiệm chết.