Năm bước để chuẩn bị xiên Agar

Posted on
Tác Giả: Louise Ward
Ngày Sáng TạO: 8 Tháng 2 2021
CậP NhậT Ngày Tháng: 19 Tháng MườI MộT 2024
Anonim
Năm bước để chuẩn bị xiên Agar - Khoa HọC
Năm bước để chuẩn bị xiên Agar - Khoa HọC

Agar là một chất giống như thạch có nguồn gốc từ các thành tế bào tinh khiết của tảo đỏ.Nó được thêm vào môi trường vi sinh, là vật liệu mà vi sinh vật được trồng trong phòng thí nghiệm, nhằm cung cấp thêm cấu trúc vững chắc cho chất này. Agar không có giá trị dinh dưỡng, vì vậy khi các nhà khoa học sử dụng nó để nuôi cấy vi sinh vật, họ bổ sung các chất dinh dưỡng khác nhau để tăng sự phát triển của vi khuẩn trong đĩa petri hoặc ống nghiệm. Khi các nhà nghiên cứu lưu trữ vi khuẩn trong ống nghiệm, nó được gọi là môi trường thạch vì môi trường phát triển chất lỏng đông cứng trong khi ống ở vị trí nghiêng. Một nắp vặn trên đỉnh xiên giúp thạch không bị khô.

    Các phương tiện được chuẩn bị khác nhau cho xiên so với đĩa petri. Khử trùng được thực hiện với môi trường thạch trong các ống; đĩa petri được khử trùng trước khi agar tiệt trùng được đổ vào chúng. Đo lượng nước cần thiết và cho vào bình Erlenmeyer. Đun nóng trên bếp cho đến khi gần sôi. Thêm các thành phần khác nếu cần và khuấy hỗn hợp từ từ và liên tục cho đến khi chúng hòa tan. Những thành phần này có thể bao gồm chiết xuất thịt bò, peptone và chất đệm pH, tùy thuộc vào loại vi sinh vật được nuôi cấy.

    Trước khi thêm bột agar khử nước, trộn nó với một lượng nhỏ nước cất lạnh để tránh bị vón cục. Hãy thận trọng khi thêm agar vào chất lỏng nóng vì nó có thể tạo bọt và tràn ra nồi. Thêm một lượng nhỏ agar cùng một lúc và khuấy để phân phối đều agar. Tắt lửa khi hỗn hợp bắt đầu hấp, trước khi nó sôi.

    Đặt các ống nghiệm chưa được khai thác trên giá đựng ống nghiệm. Đổ đầy các ống nghiệm bằng cách chuyển khoảng 5 ml - khoảng 0,17 ounce hoặc 1 muỗng cà phê - của thạch nóng chảy từ nồi bằng pipet vô trùng. Nắp lỏng lẻo từng ống nghiệm, vì môi trường thạch sẽ không được khử trùng nếu chúng được niêm phong chặt. Khử trùng tất cả các ống trong nồi hấp trong khoảng 25 phút ở 121 độ C, hoặc 250 độ F.

    Khi agar vẫn còn nóng, cẩn thận nghiêng giá giữ các ống nghiệm trên một bề mặt rắn hoặc một cuốn sách dày, đảm bảo môi trường bên trong các ống ở vị trí nghiêng so với các ống nghiệm. Để môi trường nguội và đông cứng ở góc này, làm tăng diện tích bề mặt của thạch. Vặn chặt nắp của ống nghiệm sau khi thạch nguội. Các xiên đã sẵn sàng để sử dụng một khi agar đã đông cứng. Chúng có thể được lưu trữ ở nhiệt độ phòng hoặc trong tủ lạnh để sử dụng trong tương lai.

    Cấy xiên bằng cách chuyển các tế bào có vòng cấy từ một vi sinh vật đơn bào trên đĩa sang bề mặt nghiêng. Di chuyển vòng lặp trên bề mặt của xiên và tóm tắt các ống. Ủ ấm cho đến khi có bằng chứng về sự tăng trưởng, sau đó đặt ống vào tủ lạnh.