NộI Dung
Enzyme là các protein hoạt động để giảm năng lượng kích hoạt trong các phản ứng hóa học trong khi không bị tiêu thụ trong phản ứng. Về mặt sinh học, enzyme là các phân tử thiết yếu giúp tăng tốc độ phản ứng trong các hệ thống trao đổi chất. Kết quả là, động học enzyme nghiên cứu tốc độ phản ứng của enzyme trong các môi trường hóa học khác nhau. Nhiều yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ của một enzyme. Nồng độ của chất nền, nhiệt độ, chất ức chế và pH ảnh hưởng đến ngưỡng của enzyme trong phản ứng hóa học. Với sự trợ giúp của các mối quan hệ tuyến tính như âm mưu Lineweaver-Burk, bạn có thể tìm thấy tốc độ tối đa của một enzyme.
Dễ dàng tính toán Vmax trong âm mưu Lineweaver-Burk
Bắt đầu bằng cách vẽ phương trình Michaelis-Menten để có đường cong hyperbole. Sau đó, sử dụng phương thức đối ứng của phương trình Michaelis-Menten để thu được dạng chặn của hoạt động enzyme. Tiếp theo, bạn sẽ đạt được tốc độ hoạt động của enzyme là 1 / Vo = Km / Vmax (1 /) + 1 / Vmax, trong đó Vo là tốc độ ban đầu, Km là hằng số phân ly giữa cơ chất và enzyme, Vmax là tối đa tỷ lệ, và S là nồng độ của chất nền.
Do phương trình chặn độ dốc liên quan đến tốc độ với nồng độ của chất nền, bạn có thể sử dụng công thức điển hình của y = mx + b, trong đó y là biến phụ thuộc, m là độ dốc, x là biến độc lập và b là y-đánh chặn. Trước phần mềm máy tính cụ thể, bạn sẽ sử dụng giấy vẽ để vẽ đường. Bây giờ, bạn sử dụng phần mềm cơ sở dữ liệu điển hình để vẽ phương trình. Vì vậy, biết tỷ lệ ban đầu, Vo và nồng độ khác nhau của chất nền, bạn có thể tạo một đường thẳng. Biểu đồ đường biểu thị độ dốc của Km / Vmax và y-chặn của 1 / Vmax. Tiếp theo, sử dụng đối ứng của phần chặn y để tính Vmax của hoạt động enzyme.
Sử dụng cho âm mưu Lineweaver-Burk
Các chất ức chế làm thay đổi tốc độ tối đa của hoạt động enzyme chủ yếu theo hai cách: cạnh tranh và không cạnh tranh. Một chất ức chế cạnh tranh liên kết với vị trí kích hoạt của một enzyme chặn chất nền. Theo cách này, chất ức chế cạnh tranh với chất nền để liên kết với vị trí enzyme. Cho phép nồng độ cao của chất ức chế cạnh tranh đảm bảo sự gắn kết với trang web. Do đó, chất ức chế cạnh tranh làm thay đổi động lực học của tốc độ enzyme.Đầu tiên, chất ức chế điều chỉnh độ dốc và x-chặn Km tạo ra độ dốc lớn hơn nhiều. Tuy nhiên, tỷ lệ tối đa, Vmax, vẫn giữ nguyên.
Mặt khác, một chất ức chế không cạnh tranh liên kết ở một vị trí khác với vị trí kích hoạt của enzyme và không cạnh tranh với chất nền. Chất ức chế sửa đổi các thành phần cấu trúc của vị trí kích hoạt ngăn chất nền hoặc phân tử khác liên kết với vị trí. Sự thay đổi này tác động đến ái lực của cơ chất với enzyme. Các chất ức chế không cạnh tranh làm thay đổi độ dốc và độ chặn y của âm mưu Lineweaver-Burk, làm giảm Vmax trong khi tăng độ chặn y với độ dốc cao hơn. Tuy nhiên, chặn x vẫn giữ nguyên. Mặc dù cốt truyện Lineweaver-Burk hữu ích theo nhiều cách, nhưng cốt truyện dòng có những hạn chế. Thật không may, cốt truyện bắt đầu biến dạng tỷ lệ ở nồng độ cơ chất rất cao hoặc thấp, tạo ra phép ngoại suy trên lô.