Cách đo nhiệt độ tối ưu cho enzyme

Posted on
Tác Giả: Robert Simon
Ngày Sáng TạO: 20 Tháng Sáu 2021
CậP NhậT Ngày Tháng: 18 Tháng MườI MộT 2024
Anonim
Cách đo nhiệt độ tối ưu cho enzyme - Khoa HọC
Cách đo nhiệt độ tối ưu cho enzyme - Khoa HọC

Một enzyme là một protein xúc tác (làm tăng tốc độ) các phản ứng hóa học. Nhiệt độ tối ưu của hầu hết các enzyme, hoặc nhiệt độ mà enzyme tạo điều kiện thuận lợi nhất cho các phản ứng, là từ 35 đến 40 độ C. Tăng nhiệt độ trong cửa sổ này làm tăng tốc độ phản ứng, bởi vì nó kích thích các phân tử và tăng tốc độ các enzyme / chất phản ứng va chạm và phản ứng để tạo ra sản phẩm. Tuy nhiên, việc tăng nhiệt độ quá nhiều có thể làm biến tính enzyme và ngăn không cho nó hoạt động.

Xác định nhiệt độ enzyme tối ưu bằng cách đun nóng phản ứng bằng lượng vô cực và lấy các mẫu nhỏ của phản ứng, để xác định khi nào tốc độ sản xuất sản phẩm tối đa xảy ra.

    Chọn một phương pháp. Xác định cách bạn sẽ đo nồng độ sản phẩm của mình tại các điểm khác nhau trong thử nghiệm. Chẳng hạn, bạn có thể đo nồng độ của nhiều sản phẩm bằng máy đo quang phổ và tính toán nồng độ từ độ hấp thụ, hoặc bằng cách đo huỳnh quang và tính nồng độ từ huỳnh quang.

    Thiết lập thử nghiệm của bạn. Đặt các chất phản ứng và enzyme của bạn trong một hộp nhỏ có nắp, chẳng hạn như lọ khử mùi. Phản ứng sẽ bắt đầu. Đặt lọ scintillation trong một cốc lớn hơn nước nhiệt độ phòng. Đặt cốc lên một tấm gia nhiệt. Đặt nhiệt kế bên trong cốc thủy tinh. Điều này cho phép bạn đo nhiệt độ của phản ứng tại các điểm khác nhau.

    Lấy một mẫu 100 microliter của phản ứng ở nhiệt độ phòng, khoảng 25 độ C. Bật tấm sưởi. Ở các nhiệt độ khác nhau trong khoảng từ 30 đến 40 độ C (30,5, 31, 31,5, v.v.), hãy lấy 100 mẫu microliter cho phản ứng của bạn.

    Xác định nồng độ của sản phẩm của bạn ở mỗi nhiệt độ. Khi nhiệt độ tăng lên trên 40 độ C, bạn sẽ thấy tốc độ chuyển chất nền thành sản phẩm giảm do enzyme bị biến tính. Điểm tại đó sản phẩm đang được sản xuất ở tốc độ tối đa là điểm tại đó nhiệt độ ở mức tối ưu.