Cách tính nồng độ tế bào

Posted on
Tác Giả: John Stephens
Ngày Sáng TạO: 25 Tháng MộT 2021
CậP NhậT Ngày Tháng: 9 Có Thể 2024
Anonim
Cách tính nồng độ tế bào - Khoa HọC
Cách tính nồng độ tế bào - Khoa HọC

Các nhà khoa học và kỹ thuật viên thường cần tính toán nồng độ của các tế bào trong một huyền phù. Ví dụ, khi một bệnh nhân được lấy máu tại văn phòng bác sĩ, phòng thí nghiệm có thể sử dụng một số phương pháp nhất định để tìm kiếm lượng tế bào bạch cầu trong một thể tích máu nhất định. Điều này cung cấp cho bác sĩ rất nhiều thông tin về sức khỏe của bệnh nhân của cô, đặc biệt là hệ thống miễn dịch và liệu anh ta đang chiến đấu với nhiễm trùng hay bệnh khác. Các xét nghiệm như thế này có thể tìm kiếm nhiều tế bào khác trong máu cũng như dịch tủy sống và các chất dịch cơ thể khác, chẳng hạn như số lượng tế bào tinh trùng trong tinh dịch cho mục đích sinh sản. Các nhà khoa học cũng tính toán nồng độ tế bào của vi khuẩn, nấm men và các vi sinh vật khác cho nhiều mục đích khác nhau, từ nghiên cứu sinh thái đến công nghệ công nghiệp. Một trong những kỹ thuật phổ biến nhất cũng được dạy trong nhiều lớp sinh học đại học và nó sử dụng một thiết bị gọi là buồng đếm.

    Trước khi huyền phù tế bào có thể đi vào buồng đếm, nó có thể cần pha loãng vì nó có thể chứa hàng ngàn hoặc hàng triệu tế bào. Trong trường hợp đó, các ô không thể được tính một cách hợp lý. Để pha loãng mẫu, sử dụng pipet vô trùng để đặt mười microlit của dung dịch tế bào trong ống nghiệm chứa 90 microlit của chất pha loãng. Loại chất pha loãng sẽ phụ thuộc vào loại tế bào. Trộn đều. Dung dịch này bây giờ pha loãng hơn mười lần so với mẫu ban đầu, vì vậy hệ số pha loãng của nó là 10-1. Gắn nhãn nó. Lặp lại nhiều lần, sử dụng pipet vô trùng mỗi lần, cho đến khi dung dịch đủ loãng. Nếu bạn pha loãng lần thứ hai, ống nghiệm thứ hai đã pha loãng hơn 100 lần so với dung dịch ban đầu, vì vậy hệ số pha loãng là 10-2 vân vân

    Bạn có thể cần phải thử một vài pha loãng để xác định hệ số pha loãng phù hợp cho buồng đếm. Một buồng đếm về cơ bản là một hộp hình chữ nhật rất nhỏ, rõ ràng với độ sâu chính xác và một lưới chính xác được ghi trên đỉnh. Nó cũng được biết đến như là một hemocytometer, hoặc đôi khi là hemacytometer. Mục đích là để hệ thống treo đủ loãng để khi nó được xem trong buồng đếm, không có ô nào trùng nhau và chúng được phân phối trên toàn lưới theo kiểu đồng nhất. Pipet huyền phù pha loãng chứa các tế bào vào giếng trong buồng đếm, nơi nó sẽ lắng vào buồng lưới thông qua hành động mao dẫn. Đặt buồng đếm trên tầng kính hiển vi và xem nó dưới công suất thấp.

    Lưới chứa các hình vuông được làm bằng các hình vuông nhỏ hơn. Chọn khoảng bốn hoặc năm ô vuông, hoặc nhiều ô bạn cần đếm ít nhất 100 ô, theo mẫu bạn chọn, chẳng hạn như bốn góc và hình vuông ở giữa. Nếu các ô lớn, đây có thể là các ô vuông lớn, nhưng nếu các ô nhỏ, bạn có thể chọn các ô nhỏ hơn để thay thế.

    Thể tích cụ thể của mỗi ô vuông lưới có thể thay đổi tùy theo nhà sản xuất buồng đếm, nhưng thông thường, độ sâu của buồng là 0,1 mm, diện tích của các ô vuông lớn là 1 milimet vuông và diện tích của các ô vuông nhỏ hơn là 0,04 mm vuông. Các hình vuông lớn hơn, sau đó, có thể tích 0,1 milimét. Trong ví dụ này, giả sử bạn đã đếm tổng cộng 103 ô trong năm ô vuông và bạn đã pha loãng mẫu ban đầu cho đến khi hệ số pha loãng là 10-2.

    Nếu mỗi ô vuông có thể tích 0,1 milimét khối và năm khối được tính, thì tổng thể tích của buồng được tính là 0,5 milimét khối, và có 103 ô. Nhân đôi để làm cho nó 1 milimet khối sẽ làm cho nó 206 ô. Một centimet khối tương đương với 1 mililit, đây là phép đo hữu ích cho chất lỏng. Có 1.000 milimét khối trong một centimet khối. Do đó, nếu đã có một centimet khối, hoặc mililit, huyền phù, bạn sẽ đếm được 206.000 (206 x 1.000) tế bào. Đây là những gì nó trông giống như một phương trình:

    Khối lượng hình vuông lưới × số lượng hình vuông được tính = tổng khối lượng của hệ thống treo được tính

    Số lượng tế bào ÷ thể tích huyền phù đếm = số lượng tế bào trên mỗi milimet khối

    Số lượng tế bào trên mỗi milimet được tạo khối × 1000 = số lượng tế bào trên mỗi mililit

    Bạn sẽ cần tính đến mọi pha loãng được thực hiện để làm cho dung dịch ban đầu có thể đếm được dưới kính hiển vi. Trong ví dụ này, hệ số pha loãng là 10-2. Để tính nồng độ ban đầu của dung dịch:

    Số lượng tế bào trên mỗi mililit factor hệ số pha loãng = Nồng độ tế bào

    Trong ví dụ này, số lượng tế bào trên mỗi mililit là 206.000 và chia cho 10-2 (0,01) cho nồng độ tế bào là 20.600.000 tế bào trên mililit trong mẫu ban đầu.