Chuẩn độ là một thí nghiệm hóa học trong đó bạn nhỏ giọt - "chuẩn độ" - chất này sang chất khác bằng ống thủy tinh (buret) và cốc thủy tinh. Trong chuẩn độ axit-bazơ, bạn chuẩn độ bazơ thành axit cho đến khi đạt đến "điểm tương đương" hoặc dung dịch trung tính có pH là 7. Trước khi điều này xảy ra, dung dịch trong cốc của bạn là "dung dịch đệm" mà thay đổi độ pH khi bạn thêm một lượng nhỏ axit. Bạn có thể biểu thị mức độ axit của bạn phân tách - và do đó thay đổi pH dung dịch - sử dụng giá trị "pKa" của nó và bạn có thể tính giá trị này bằng cách sử dụng dữ liệu từ thí nghiệm chuẩn độ của mình.
Chọn một điểm trên đường chuẩn độ của bạn trước điểm tương đương và ghi lại pH của nó, đó là tọa độ dọc của đường cong. Ví dụ vì lợi ích, giả sử bạn đang phân tích một giải pháp tại một điểm khi độ pH của nó là 5,3.
Xác định tỷ lệ của axit với bazơ liên hợp của nó tại thời điểm này, lưu ý khối lượng bạn cần thêm để đạt đến điểm tương đương. Giả sử bạn cần thêm 40 mL để đạt điểm tương đương. Nếu, tại thời điểm khi độ pH là 5,3, bạn đã thêm 10 mL, điều đó có nghĩa là bạn đi được một phần tư quãng đường đến điểm tương đương. Nói cách khác, ba phần tư axit vẫn cần phải được trung hòa và cơ sở liên hợp axit chiếm một phần tư dung dịch tại thời điểm này.
Cắm các giá trị của bạn vào phương trình Henderson-Hasselbalch, pH = pKa + log (/), trong đó nồng độ của bazơ liên hợp và là nồng độ của axit liên hợp. Hãy nhớ rằng vì bạn đã đo pH là một hàm của thể tích chuẩn độ, bạn chỉ cần biết tỷ lệ giữa bazơ liên hợp với axit. Tại thời điểm khi giải pháp ví dụ có pH là 5,3, đây là (1/4) / (3/4) hoặc 1/3: 5.3 = pKa + log (1/3) = pKa + -.48; nên 5,3 + .48 = pKa + -.48 + .48 hoặc pKa = 5.78.